人Leptin基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的克隆Leptin基因,构建其重组表达菌株,并对表达产物进行免疫学鉴定.方法利用RT-PCR方法从脂肪细胞RNA中扩增出人瘦素前体(pre-Leptin)的cDNA片段和去信号肽序列的Leptin成熟基因片段,并插入pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达重组人瘦素(rh-Leptin)的菌株.结果DNA序列分析显示获得的pre-Leptin和成熟基因片段的序列与预计序列一致,菌株诱导后经SDS-PAGE检测,rh-Leptin表达量达菌体总蛋白的40%以上.Western blot分析显示重组Leptin具有免疫学活性.结论已获得高效表达Leptin的重组菌株.

关键词：Leptin、克隆、表达、大肠杆菌

所属期刊栏目：18

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2005-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：371-374