10.3969/j.issn.1004-5503.2005.04.006
人蛋白C转基因小鼠的建立及乳腺表达
目的为了获得乳腺定位表达人蛋白C(hPC)的转基因动物.方法采用分步克隆的方法,构建大鼠乳清酸蛋白(WAP)启动子调控的人蛋白C质粒,命名为pWPC.将该质粒系统鉴定后,用PvuⅠ+SmaⅠ双酶切,回收4.6kb的片段(WAP-hPC-PolyA).通过显微注射技术,将其注入昆明小鼠受精卵雄原核内;共注受精卵810枚,存活640枚,移植给28只假孕母鼠,怀孕的18只母鼠共产仔81只.结果提取鼠尾基因组DNA进行PCR检测,34只阳性,再经Southern blot检测,其中20只整合阳性;将7只整合阳性母鼠传代,产仔7日后收集乳汁,进行ELJSA检测,结果均有表达.结论已成功建立了人蛋白C转基因鼠乳腺生物反应器,为hPC乳腺表达研究奠定了基础.
乳清酸蛋白、人蛋白C、转基因小鼠
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R-33(医学研究方法)
军事医学科学院创新项目020901
2005-09-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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