重组人BAFF134～285的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

摘要：

目的克隆人TNF家族的B细胞激活因子(B cell activatingfactor to the TNF family,BAFF)胞外区cDNA,并进行高效表达和纯化.方法提取人新鲜扁桃体组织总RNA,经RT-PCR扩增编码人BAFF胞外区134～285氨基酸残基cDNA,经序列测定后,克隆至pQE-80L载体中,并转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达及Ni2+-NTA柱层析纯化目的蛋白,最后经SDS-PAGE和Western blot检测.结果RT-PCR扩增得到了459bp的cDNA片段,序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF134-285的cDNA序列一致,SDS-PAGE及Western blot证实表达蛋白确实为6 × His-BAFF134-285融合蛋白,并存在于包涵体中.结论利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF134-285,为进一步研究其生物学活性奠定了基础.

关键词：肿瘤坏死因子、B细胞激活因子(BAFF)、cDNA、克隆、原核表达

所属期刊栏目：18

分类号：Q81(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金30370319,30271228

在线出版日期：2005-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：190-192,217