10.3969/j.issn.1004-5503.2005.03.003
RGD特异性结合多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因的克隆表达及其抑瘤活性
目的构建RGD多肽与重组改构人肿瘤坏死因子融合基因,进一步提高rmhTNF的临床疗效.方法应用基因重组技术构建了CRGDC与rmhTNF的融合基因,在E.coli DH5α中诱导表达重组蛋白RGD-rmhTNF,采用溶菌酶法裂解菌体,裂解上清经硫酸铵沉淀、阴阳离子交换层析纯化后,用S180荷瘤小鼠模型和L929细胞体外杀伤实验测定纯化的重组蛋白RGD-rmhTNF的体内、外杀伤活性.结果正确构建了编码RGD-rmhTNF融合基因,重组工程菌升温诱导后以部分可溶形式表达RGD-rmhTNF,纯化后纯度为96.88%,体外对L929细胞杀伤作用的比活性为3.6×108IU/mg,与rmhTNF相当(3.0×108IU/mg).在S180荷瘤小鼠模型中,当RGD-rmhTNF剂量为12×115IU/kg时,对肿瘤的生长抑制率为84.9%,显著高于相同剂量的rmhT-NF(肿瘤抑制率为59.09%,P<0.01)和环磷酰胺组(肿瘤抑制率为71.21%,P<0.01).结论重组蛋白RGD-rmhTNF可以提高rmhTNF的治疗效果.
肿瘤坏死因子、肿瘤导向肽、抑瘤活性
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Q81(生物工程学(生物技术))
2005-06-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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