人组织激肽释放酶成熟蛋白的纯化及活性分析

摘要：

目的制备纯化人组织激肽释放酶,并检测其生物活性,为中试放大及纯化工艺奠定基础.方法使用麦芽糖(MBP)融合分泌载体pMBP-P,构建并筛选出1株工程菌株,在6L培养基中经IPIG诱导表达人组织激肽释放酶融合蛋白.目的蛋白经亲和层析纯化及凝血酶切割后,采用电位滴度法测定其活力.结果筛选出的工程菌株表达相对分子质量约70000的激肽释放酶融合蛋白,大小与预计大小相符.纯化后共获得28 mg蛋白,并具有水解苯甲酰精胺酸乙酯(BAEE)的能力.结论成功进行了人组织激肽释放酶融合成熟蛋白的小量制备,经纯化后的产物具有生物活性,为中试放大、纯化工艺研究奠定了基础.

关键词：人组织激肽释放酶、大肠杆菌、制备、纯化、生物活性

所属期刊栏目：18

分类号：R392

资助基金：广东省科技攻关项目C11801

在线出版日期：2005-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：33-35