噬菌体展示抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子的筛选和序列分析

摘要：

目的从自建的免疫噬菌体展示Fab抗体库中获得抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子,并进行基因序列分析.方法采用纯化的乙型肝炎病毒表面抗原作为包被抗原,对自建的4×105Fab噬菌体抗体库进行富集筛选,从阳性强的次级库中挑选单个克隆菌,分别进行噬菌体ELISA、PCR和限制性内切酶鉴定后,再选取三者均为阳性的克隆菌进行基因序列分析.结果共挑选了60个单克隆菌株,其中噬菌体ELISA阳性有27个,阳性率为45%;PCR鉴定均为相应大小片段;限制性内切酶鉴定表明27个阳性克隆菌中有13个具有约1 500 bp的片段,其余均为约750 bp大小;BstOI酶切鉴定表明各克隆菌的酶切方式不同;选取5个含约1 500 bp片段和2个含约750 bp片段的克隆菌株,经测序均为人免疫球蛋白基因,且重链分别属于VH3、VH4、VH5家族,轻链分别属于L5、L6、L8和012/02家族.结论从自建的免疫噬菌体展示Fab抗体库中成功地获得了抗乙型肝炎病毒表面抗原Fab抗体分子.表明所构建的抗乙型肝炎病毒表面抗原的Fab抗体库的抗体基因具有多样性.

关键词：免疫噬菌体展示Fab抗体库、筛选、噬菌体ELISA、序列

所属期刊栏目：18

分类号：R5(内科学)

在线出版日期：2005-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-4