10.3969/j.issn.1004-5503.2004.03.009
表达HIV-1 gp160膜蛋白靶细胞的制备及鉴定
目的获得表达HIV-1 bp160膜蛋白的靶细胞,用于HIV-1特异性细胞毒性淋巴细胞(CTL)和抗HIV-1重组毒素细胞杀伤活性检测.方法采用PCR方法,从质粒pJen 10中扩增HIV-1 gp160基因,插入pGEM-T 载体,测序后克隆入pIRES1 ngo载体中构建成重组质粒pIRE160,酶切鉴定正确后,转染人肝癌细胞(SMMC-7721),G418加压筛选至细胞不再死亡为止,并采用Western blot和间接免疫荧光法对制备的靶细胞进行检测.结果HIV-1 gp160在SMMC7721表面表达,并裂解为gp120和gp41蛋白.结论已成功得到稳定表达HIV-1 bp160的靶细胞,且表达的蛋白具有良好的特异性.
HIV-1、gp160、靶细胞、膜蛋白
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R511(传染病)
吉林省重点项目20010404
2004-07-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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