绿色荧光蛋白融合表达HBsAg基因载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

摘要：

目的构建绿色荧光蛋白融合表达HBsAg基因的载体,并检测其在COS-7细胞中的表达.方法采用PCR获得HBsAg基因;利用该基因片段和质粒pEGFP 3.1的HindⅢ/ KpnⅠ限制性酶切位点构建融合表达载体pGHBs 3.1;通过脂质体介导的方法将该载体转染到COS-7细胞中,用PCR法检测基因转染,ELISA检测HBsAg的瞬时表达,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达.结果融合表达载体pGHBs 3.1转染COS-7细胞后,在细胞中检测到HBsAg基因片段,转染细胞培养上清中检测到HBsAg表达,用荧光显微镜观察到转染细胞中有绿色荧光蛋白表达.结论表达载体pGHBs 3.1在COS-7细胞中获得了表达,表达的融合蛋白具有HBsAg和绿色荧光蛋白的双重活性,该载体可用绿色荧光蛋白作为报告基因观察HBsAg的表达及定位.

关键词：绿色荧光蛋白、HBsAg、融合蛋白、表达

所属期刊栏目：17

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2004-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：68-70