重组人肽抗生素hPAB-β的初步纯化

摘要：

目的探索重组人肽抗生素hPAB-β的纯化工艺,为制备高纯度、高活性的重组hPAB-β奠定基础.方法将构建的含pQE32-CP-hPAB-β重组质粒的基因工程菌扩大培养,诱导表达后所得菌体经溶菌酶法裂解,鉴定融合蛋白表达形式;以含融合蛋白的溶液作为纯化的初始样品,采用Ni-NTA resin亲和层析柱对融合蛋白进行纯化,用CNBr裂解,利用Sephadex G-50、Bio-gel P6 DG凝胶进行分子筛层析,利用Macro-Prep High S进行阳离子交换层析,对层析峰行Tris-Tricine电泳分析.结果融合蛋白以包涵体形式存在;亲和层析获得了纯度为82.6%的融合蛋白,CNBr作用20h可完成融合蛋白的裂解;目的肽经纯化后,纯度达95%以上.结论已初步建立了重组人肽抗生素hPAB-β的纯化工艺,并获得了高纯度的肽抗生素hPAB-β.

关键词：抗生素、重组蛋白

所属期刊栏目：17

分类号：Q7(分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金30171119;军队重点项目01Z070;国家高技术研究发展计划863计划2002A214211

在线出版日期：2004-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：42-44