10.3969/j.issn.1004-5503.2004.01.002
水泡性口炎病毒核蛋白基因的克隆和序列分析
目的对水泡性口炎病毒编码群特异性抗原的N基因进行PCR扩增、克隆和序列分析.方法将水泡性口炎病毒编码群特异性抗原的N基因片段克隆至pMD18-T载体中,构建N基因重组质粒载体.进行PCR及限制性内切酶分析,筛选获得N基因插入的阳性克隆.经核苷酸序列分析,并与Genbank中的VSV编码核衣壳蛋白N基因序列进行比较.结果该序列与VSV New Jersey型的09/82-HD-B株同源性最高,核苷酸和推测氨基酸的同源性分别为98.9%和98.8%,有13个核苷酸差异,伴有5个氨基酸改变,第72位的酪氨酸变为组氨酸,第89位的缬氨酸变为异亮氨酸,第183位的天冬氨酸变为天冬酰胺,第205位的苯丙氨酸变为亮氨酸,第418位的丙氨酸变为缬氨酸;与Indiana型各株的同源性较低,与Glasgow株相比,核苷酸和氨基酸的同源性分别为67.9%和716%.结论已成功地克隆了水泡性口炎病毒N基因,为水泡性口炎免疫血清学诊断试剂的制备和分子生物学研究打下了坚实基础.
水泡性口炎病毒、核蛋白基因、克隆、序列分析
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家科技攻关项目2001BA804A22;云南省自然科学基金2002C0072M;云南省昆明市科技基金昆科农字200202003
2004-06-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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