10.3969/j.issn.1004-5503.2003.04.002
HCV核心区全基因片段的表达及产物抗原活性分析
目的表达并纯化核心基因全片段,以得到良好特异性的核心蛋白.方法自克隆载体pUC19/HCV-C中切下核心基因全片段,将其插入带有His 6纯化标签的融合表达质粒pTrcHisA中,转化人大肠杆菌,经IPTG诱导,通过SDS-PAGE、中和抑制ELISA和Western blot对占菌体总蛋白15%以上的表达产物进行鉴定,用IMAC一步法纯化,纯化产物检测HCV阴阳性血清标本,并与日本东燃公司核心抗原C11检测结果进行比较.结果核心基因全片段插入pTrcHisA载体,转化入大肠杆菌TOP10后构建成功稳定的表达株PTrcHisA/HCV-C/TOP10,用纯化产物检测血清标本,与日本东燃公司核心抗原C11检测结果的阳性均值与阴性均值之比及A值分布基本相同.结论表达抗原具有良好的免疫反应性和特异性.
丙型肝炎核心基因、抗原活性、全基因片段
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R446(诊断学)
2004-01-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
197-200