人肝细胞生长因子β链在E.coli中的表达、纯化及活性测定

摘要：

目的为获得重组人肝细胞生长因子β(rhHGF-β)的高效表达体系,分离纯化rhHGF-β,以期研究其在生物学和医学中的作用.方法从人胎肝组织中提取总RNA,采用RT-PCR技术,对HGF-β基因加工修饰,与载体PBV220重组,构建rhHGF-β的表达载体,转化大肠杆菌,筛选rhHGF-β的高效表达菌株.对rhHGF-β进行粗纯化,透析复性后MTT法检测生物活性.结果获得了rhHGF-β完整的cDNA序列,重组克隆的酶切结果与设计一致.目的蛋白的表达量占全菌蛋白的30%,粗纯化后纯度达90%,复性产物能刺激大鼠肝细胞的增殖.结论建立了rhHGF-β的表达体系,获得了具有生物活性的rhHGF-β,为进一步大量制备和研究HGF的生物学功能提供了重要的实验数据.

关键词：人肝细胞生长因子β链基因、克隆、生物学活性

所属期刊栏目：16

分类号：Q7(分子生物学)

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：193-196