幽门螺杆菌过氧化氢酶基因克隆及表达

摘要：

目的克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)过氧化氢酶(katA)基因并在大肠杆菌中进行表达.方法采用PCR扩增幽门螺杆菌katA全长基因,将其克隆入pET-11c载体中,经测序证实后,在大肠杆菌中进行表达,产物用Western blot检测其抗原性并进行N末端氨基酸的测序.结果幽门螺杆菌katA基因全长1 518bp,编码氨基酸505个.在BL21(DE3)中的表达量约占细菌总蛋白的24.9%,表达产物经SDS-PAGE显示其相对分子质量与软件预测结果58 000相符,N末端5个氨基酸测序结果与Hp中天然的katA完全一致,经Western blot检测可被Hp全菌抗血清识别.结论katA能在大肠杆菌中进行高效表达,具有良好的免疫反应性,可望为研究Hp的致病机理、实验诊断及亚单位疫苗等提供充足的katA原材料.

关键词：幽门螺杆菌、过氧化氢酶、大肠杆菌

所属期刊栏目：16

分类号：R573;R9(消化系及腹部疾病)

资助基金：国家科技攻关项目96-901-01-54;国家项目;国家高技术研究发展计划863计划2001AA215161

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：151-154