汉坦病毒核蛋白基因截短片段在大肠杆菌中表达及其产物的初步应用

摘要：

目的获得汉坦病毒重组核蛋白,并将其应用于血清学诊断.方法采用PCR方法,从带有HTN型Z10株病毒全长核蛋白基因的质粒上扩增读码框的前354bp的核蛋白基因片段.将截短的核蛋白基因片段插入表达载体pGEX-20T,得到重组质粒pGEX20-Z10trNP,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经Glutathione Sepharose 4B柱纯化,并进行抗原性及抗原特异性检测.结果 pGEX20-Z10trBP表达产物是相对分子质量约为40000的谷光甘肽转移酶(GST)融合蛋白GST-Z10trNP.经Western blot分析,GST-Z10trNP具有良好的抗原性.用纯化GST-Z10trNP为抗原,用ELISA间接法检测出血热病人血清、出血热疫苗免疫的家兔及小鼠血清,均能很好地区分阴性和阳性血清.结论 GST-Z10trNP表达量高,易于纯化,并且具有良好的抗原性及抗原特异性,是一种安全、廉价的诊断抗原.

关键词：汉坦病毒、重组核蛋白、免疫印迹试验、间接酶联免疫吸附试验

所属期刊栏目：16

分类号：R392

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-4