10.3969/j.issn.1004-5503.2002.02.003
应用毕赤酵母表达中国株HIV-1核心蛋白Gag
目的构建含HIV-1Gag全长基因的重组酵母表达质粒pPICGAG,并在毕赤酵母中进行表达.方法用Not I和XhoI将含HIV-1 Gag全长基因的质粒pKSGAG双酶切后,克隆到酵母表达载体pPIC9中,构建了重组表达质粒pPICGAG.pPICGAG用SacI线性化后,电转化毕赤酵母GS115,PCR鉴定阳性酵母转化子,并分别将PCR阳性的酵母转化子在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE电泳分析.结果酵母转化子的整合率为72.7%.SDS-PAGE结果显示表达蛋白的相对分子质量为55000左右,与预计计算的值相同.Western blot结果显示表达蛋白能与单克隆抗体发生特异性反应.结论在毕赤酵母中成功地表达了HIV-1核心蛋白Gag,且表达的蛋白具有良好的反应原性和特异性.
HIV-1、核心蛋白、毕赤酵母、表达
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R392
2004-01-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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