重组人IL-18的高效表达、纯化及诱导KG-1细胞产生高水平IFN-γ

摘要：

目的研究IL-18在大肠杆菌中高效表达及纯化工艺,并诱导KG-1细胞产生IFN-γ.方法利用RT-nPCR从正常人胎肝组织中扩增获得人IL-18基因, 克隆于pThiohisA载体,转化宿主菌BL-21,1mmol/L IPTG诱导,表达产物以包涵体形式存在,经2%Triton X-100洗涤,在8mol/L尿素下变性阴离子柱层析,透析复性后再经凝胶过滤纯化,通过纯化产物诱导人骨髓瘤单核细胞KG-1(ATCC CCL-246)产生 IFN-γ,并检测其生物学活性.结果获得了在大肠杆菌中的稳定高效表达,表达的目的蛋白占菌体总蛋白的25%左右,纯化后纯度可达95%以上,具有显著的刺激细胞产生IFN-γ的活性.结论制备具有生物学活性高纯度的rhIL-18方法的建立,为基础研究与临床应用开发奠定了基础.

关键词：IL-18 IFN-γ KG-1

所属期刊栏目：15

分类号：R3(基础医学)

资助基金：云南省面上项目1999C0096M

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：24-26