类胰岛素生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因的克隆及融合蛋白的表达

摘要：

目的扩增类胰岛素生长因子I(IGF-Ⅰ)210bp的DNA片段,将其克隆到PGEX-1 λT质粒,并转化到E.coli NH522中高效表达.方法用改进的RT-PCR法合成人肝脏cDNA,然后从该cDNA文库中扩增出IGF-I基因.将扩增的IGF-I cDNA用BamHI和EcoRI双酶切后,插入到同样双酶切处理的pGEX-1 λT载体中,连接转化E.coli NM522,筛选克隆,酶切鉴定后,进行了核苷酸序列分析及表达.结果将IPTG诱导表达的菌体离心收集,经SDS-PAGE分析,在相对分子质量34000处可见明显高表达带,表达量可占菌体蛋白总量的20%以上.免疫印迹表明重组蛋白具有IGF-I的抗原性.结论重组人IGF-I的成功克隆与表达,将为进一步研究人IGF-I的生物学特性打下基础.

关键词：人类胰岛素生长因子(hIGF-I) PCR、表达

所属期刊栏目：14

分类号：R392

资助基金：吉林省科技发展计划

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：139-142