人血管内皮生长因子受体FLT-1胞外区1-3环cDNA的表达、纯化及鉴定

摘要：

目的 研究人血管内皮生长因子受体FLT-1胞外区1-3环cDNA在酵母菌中的表达、纯化及生物学活性。方法 将编码316个氨基酸残基的人FLT-1胞外区1-3环cDNA插入到含AOX1启动子和d分泌信号肽序列的Pichia pastoris酵母载体中，构建了重组表达质粒pPICqk／FLT-1(1～3)，转化酵母宿主菌GS115，筛选His+Mut表型转化子，经摇瓶培养，1％甲醇诱导表达。结果 经SDS-PAGE显示，表达产物以可溶性分子形式存在于上清中，诱导4天的表达量达到培养上清总蛋白的60％，径Western blot检测抗原性及特异性良好，经CM-Sepharose FF阳离子交换层析和Sephacryls-100分子筛层析，纯度达90％以上；经生物活性检测具有结合hVEGFl65的能力和hVEGF165促进HUVEC的增殖功能。结论 人血管内皮生长因子受体FLT-1胞外区l～3环cDNA在酵母菌中表达成功。

关键词：血管内皮生长因子、受体、毕赤巴斯德酵母、表达

所属期刊栏目：13

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划;广东省自然科学基金

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：196-200