人热休克蛋白73的基因重组、表达和纯化

摘要：

目的用基因重组的方法表达人热休克蛋白73,并纯化表达产物,用于进一步分析.方法用人热休克类似蛋白HSP73基因构建原核细胞表达载体pETHSP73,在大肠杆菌BL21中用半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用电泳法和ATP亲和层析法提取HSP73.经SDS-PAGE、用3a3抗体Westemblot作ECL检测.结果人HSF73基因构建的载体pETHSP73能很好地在大肠杆菌表达出相对分子质量为73000的蛋白.两种蛋白提取方法均能有效提纯表达的蛋白,该蛋白具有人HSP73抗原特性.所得蛋白质氨基酸测定和N端测序的结果与有关的报道一致.结论HSP73基因重组、表达和纯化方法的建立,为研究HSP73的结构、功能与临床应用提供了必要条件.

关键词：热休克蛋白73、基因重组、表达

所属期刊栏目：13

分类号：R3(基础医学)

资助基金：铁道部科研项目B96031

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：75-78