人血管内皮细胞生长因子在大肠杆菌中的表达及纯化

摘要：

目的为了获得大量重组人血管内皮细胞生长因子(HumanVascularEndothelialGrowthFactor,hVEGF),以研究其在心血管和药学领域具有的潜在药用价值.方法用PCR方法扩增目的基因hVEGF165,连接到pET-3a载体上,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,建立可高效表达的pET-3a/hEVGF165重组质粒,经IPTG诱导表达,Westemblot检测表达产物的抗原性,通过MonoQ阴离子层析和FPLCSuperosel2分子筛柱层析,进行初步纯化,用MTT法检测其生物学活性.结果pET-3a/hEVGF表达产物经纯化后,其纯度可达到90%以上,表达的rhEVCF165能呈剂量依赖性地促进人静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖.结论组建了天然形式hEVGF165的大肠杆菌菌株,并摸索出一套纯化工艺,为大规模生产重组hEVGF165奠定了基础.

关键词：血管内皮细胞生长因子、原核细胞、表达

所属期刊栏目：13

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：68-71