应用ELISA测定重组细胞因子中残余大肠杆菌菌体蛋白含量

摘要：

目的建立灵敏度高,重复性好的残余宿主菌E.coli菌体蛋白含量的测定方法.方法电泳显示5株大肠杆菌DH52、JM103、JM105、N8430和HB101的蛋白质组分各不相同,但均可被免疫印迹显色,说明免抗E.coli.K12,C600抗体包括了其主要菌体蛋白的抗体,因此,用ELISA检测相应的菌体蛋白含量.结果优化后的ELISA对DHa、JM103、JM105和HB101检测灵敏度均达到10ng/ml.用混合菌体蛋白作为E.coli菌体蛋白通用标准,其灵敏度达到7.8ng/ml,含量在7.8～250ng/ml范围内,一次方程(y＝a+bx)线性良好(r>0.990);在7.8～1 000ng/ml范围内,二次方程(y＝a+bx+c2)线性良好(r>0.990).变异系数小于14%(n=4).应用该法对国内外重组产品进行测定,发现不同厂家不同产品其菌体蛋白含量各不相同.8种细胞因子共57批,菌体蛋白含量大于1%的3批,占5.3%;大于0.1%的9批,占15.8%;大于0.01%的28批占49.1%.说明还有不少厂家其重组产品纯化工艺有待进一步提高.结论本方法灵敏度高,重复性好,可用于重组产品中大肠杆菌残余菌体蛋白的测定.

关键词：菌体蛋白、ELISA、重组细胞因子

所属期刊栏目：13

分类号：R392-33

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：42-45