脑去细胞生物支架的制备与鉴定

摘要：

通过化学萃取加震荡法制备脑去细胞外基质,并对其进行形态学分析和成分鉴定.健康成年SD大鼠20只,分成正常对照组和去细胞组.去细胞组大鼠经心脏灌流后取脑,通过化学萃取加震荡法,依次用3％的TritionX-100、1％的SDS、4％的脱氧胆酸钠震荡萃取,无菌蒸馏水漂洗制备脑去细胞外基质(dBECM).通过扫描电镜观察dBECM微观形态,用HE染色和荧光DAPI染色分析其去细胞化的效果,进一步通过Masson染色和免疫荧光染色进行成分的鉴定.通过HE染色及荧光DAPI染色可以发现,该方法去细胞化程度完全(去细胞程度大于99％),仅保留大量细胞外基质,未见明显的细胞及细胞核成分残留;Masson染色和免疫荧光染色发现,dBECM保留弹性蛋白(4.0％±1.1％)、层粘连蛋白(19.0％±1.6％)、纤维连接蛋白(9.0％±2.1％)、Ⅳ型胶原蛋白(16.0％±1.9％)等成分.化学萃取加震荡法可有效地去除大鼠脑组织内的细胞成分,制备得到的脑去细胞外基质较好地维持宏观和微观的三维结构,保留细胞外基质支架的蛋白成分,是一种简便且理想的脑去细胞外基质制备技术.

关键词：去细胞、大鼠、脑、细胞外基质

所属期刊栏目：37

分类号：R318(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金8157060643

在线出版日期：2018-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：202-207