重组BMP7腺病毒的构建及转染骨髓基质干细胞后的表达

摘要：

根据Clonetech公司的腺病毒载体构建流程,原核表达载体pBlue-BMP7经一系列特定的限制性内切酶酶切,重组成BMP7的腺病毒载体,并转染293细胞进行大量扩增、滴度测定.重组Adeno-BMP7经限制性内切酶PI-SceⅠ和Ⅰ-CeuⅠ双酶切获得BMP7基因片段,PCR扩增得到特异的扩增片段,表明重组的Adeno-BMP7载体构建成功,其中携带有目的基因BMP7cDNA片段.Adeno-Lac-Z的体外转染骨髓基质干细胞(BMSCs),染色表明转染率可达90%以上;RT-PCR、免疫组化证明Adeno-BMP7转染BMSCs后BMP7在基因和蛋白水平上均有表达;转染Adeno-BMP7后的BMSCs细胞悬液裸鼠肌肉内注射后,x光片和组织学观察都表明BMP7转染可明显促进新骨的形成,与没转染Adeno-BMP7的BMSCs有显著差异.

关键词：重组腺病毒、骨髓基质干细胞、骨形成蛋白7

所属期刊栏目：24

分类号：R318.04(医用一般科学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G1999054304;国家高技术研究发展计划863计划2002AA20511

在线出版日期：2005-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：245-253