聚乙二醇沉淀剂有效分离尿外泌体

摘要：

尿外泌体是病毒大小的胞外囊泡,是非侵入性获得肾及泌尿生殖道细胞生理病理信息的重要靶标.聚乙二醇沉淀剂可经济高效地分离富集血清等外泌体,但未见用于尿外泌体富集的详细报道.本研究采用聚乙二醇沉淀剂分离鉴定尿外泌体,并对其RNA组分进行检测,以期建立一个经济、高效、简便的尿外泌体分离富集方法.采集10例健康志愿者晨尿20 mL,聚乙二醇沉淀剂分离尿外泌体.透射电镜观察到直径30～ 100 nm双层膜包绕的囊性小泡,中央有直径5～15 nm高电子密度区.Western印迹检测到外泌体标记蛋白CD63、CD9、TSG101、ADAM10和内标蛋白β-肌动蛋白的表达.纳米粒径仪测定粒子直径介于30 ～130 nm,并可见25.37 nm和95.07 nm二个粒子峰.qRT-PCR扩增得到β-肌动蛋白和RNU6 RNA产物带.上述结果表明,聚乙二醇沉淀剂可分离富集尿外泌体,该法简单、高效,不需要超速离心机等昂贵设备,且采用该法富集到的外泌体可用于后续蛋白质与核酸分析.该方法可望加速液体活检应用,尤其是肾及泌尿生殖道病变的无创检测.

关键词：尿外泌体、聚乙二醇沉淀法、RNA检测

所属期刊栏目：34

分类号：R-331(医学研究方法)

在线出版日期：2018-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：110-116