重组球形红细菌5-氨基乙酰丙酸合酶同工酶hemA和hemT的特性

摘要：

将编码光合细菌Rhodobacter sphaeroides 5-氨基乙酰丙酸合酶(ALAS)的同工酶基因hemA、hemT转入E.coli中进行高表达,并将高表达的同工酶进行分离、纯化.纯化的hemA是可溶的,并具有催化活性,而hemT大部分是不溶的,且在体外条件下无活性.与其它重组ALAS相比,R.sphaeroides的hemA活性表达需PLP作为催化因子,除去PLP或用硼酸钠破坏与PLP的连接,hemA活性下降90%.hemA-PLP的紫外-可见光谱分析表明hemA与PLP之间形成一个醛亚胺键,而hemT与PLP之间未形成该键.hemA对修饰组氨酸、精氨酸、胱氨酸残基的试剂很敏感,对可切割Arg151和Ser152的类胰蛋白酶也很敏感,PLP也不能阻止该酶的切割作用.抗血清试验表明,hemA、hemT的抗血清均可与小鼠的ALAS杂交,并都有一个抗原决定簇.

关键词：Rhodobacter sphaeroides、5-氨基乙酰丙酸合酶、hemA、hemT

所属期刊栏目：21

分类号：Q78;Q55(基因工程（遗传工程）)

资助基金：科技部科技攻关项目2001BA540C

在线出版日期：2005-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：369-375