sfp基因转化增强了Bacillus subtilis 168的定殖能力和对黄瓜茎内枯萎病菌的抑制作用

摘要：

枯草芽胞杆菌B006是一株防治黄瓜枯萎病的高效菌株,可产生脂肽类抗生素表面活性素surfactin和芬枯草菌素fengycin.为深入了解surfactin在根际的作用,本研究通过同源重组的方法将生防芽胞杆菌B006菌株中编码4'-磷酸泛酰巯基乙胺转移酶Sfp的sfd基因整合到不产生surfactin的模式菌株B.subtilis168(B168)基因组中,获得了重组菌株B168S.重组菌株B168S在1％淀粉平板上不水解淀粉,在5％血平板上产生透明溶血圈;HPLC-ESI-MS检测表明菌株B168S在牛肉膏蛋白胨培养液中培养48 h后可产生surfactin.平板对峙试验表明菌株B168S在黄瓜根分泌物培养基上对Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum(Foc)菌丝生长有一定的抑制作用,抑制率R2/R1为1.22;平板菌落计数法测定表明,将菌悬液(106 cfu/mL)浸泡90 min的黄瓜种子播种于无菌石英砂3d后,菌株B168S在黄瓜根基部和根尖的定殖量分别为菌株B168的2～3倍和9～10倍;温室盆栽试验表明,黄瓜苗用浓度为106 cfu/mL的B168S和B168菌悬液蘸根后,移栽到接种Foc孢子(105孢子/g)的病土中,移栽后第3周菌株B168S和B168处理的防效分别为21.1％和17.9％;对不同高度黄瓜茎中Foc的组织分离结果表明,菌株B168S处理后Foc在黄瓜茎内蔓延的相对高度低于菌株B168和Foc处理.上述结果进一步明确了surfactin可明显促进芽胞杆菌在黄瓜根部的定殖,并通过抑制枯萎病菌的侵染和在黄瓜茎中的蔓延增强对黄瓜枯萎病的防治效果.

关键词：同源重组、sfp基因、芽胞杆菌、surfactin、黄瓜枯萎病菌

所属期刊栏目：32

分类号：S432;S476.8(病虫害及其防治)

资助基金：国家“863”计划2011AA10A205;国家大宗蔬菜产业技术体系建设项目CARS-25-B-02;国家科技支撑计划2012BAD19B01;作物根腐病综合治理技术方案201503112

在线出版日期：2016-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：76-85