副溶血弧菌总蛋白双向电泳体系的建立
目的:建立并优化副溶血弧菌总蛋白质双向电泳技术体系,为后续差异蛋白质组学研究奠定基础.方法:以副溶血弧菌为研究对象,对比研究样品制备、裂解液配方、IPG胶条长度、IPG胶条pH范围、水化上样方式、等电聚焦程序、上样量和二向胶浓度等因素,优化双向电泳体系.结果:采用超声破碎与TCA沉淀相结合的样品制备方法,能够获得较高的蛋白提取率;使用17cm pH4～7的IPG胶条,主动水化上样,上样量100嵋,上样体积300 μL,适当延长除盐时间(2.5 h)和等电聚焦总电压时间积(80 000 vhr),采用12.5％的二向分离胶,能得到较高的电泳图谱分离度和分辨率.结论:本研究建立的副溶血孤菌总蛋白质双向电泳体系具有较高的可操作性和重现性.
副溶血弧菌、总蛋白、双向电泳(2-DE)
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教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目20093326120001;浙江省自然科学基金项目Y3100675
2014-02-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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