米醋中蜡状芽孢杆菌DNA提取及其ERIC-PCR体系建立

摘要：

以蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)为试验材料,比较细菌基因组DNA的提取方法.将ERIC-PCR应用于醋液分离菌的研究,对此反应体系的主要因素进行优化,最终建立了适合于此菌种的ERIC-PCR体系.采用改良的传统细菌基因组DNA提取方法,所提取的DNA质量较高,能够满足ERIC-PCR反应的需要.反应体系:25μL反应体积10×扩增缓冲液(含Mg2+)2.5 μL,20 pmol/μL ERIC-PCR引物E1 1μL,20 pmol/μL ERIC-PCR引物E2 1μL,DNA模板2μL,2.5 mmol/LdNTPs混合液2.0 μL,taq聚合酶1.1 μL,双蒸水补齐；PCR反应程序为:94℃变性3min,1个循环；94℃变性30 s,55℃退火40 s,72℃延伸1min,30个循环；72℃延伸4min.

关键词：细菌、DNA提取、ERIC-PCR、优化

所属期刊栏目：11

分类号：TS2;TQ2

资助基金：国家“十二五”科技支撑计划项目2011BAC11B06

在线出版日期：2011-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：7-13