GOD转基因酵母菌的构建及其重组GOD的纯化与活性分析

摘要：

葡萄糖氧化酶(GOD)被广泛应用于食品工业、医学诊断试剂等[1,3].目前葡萄糖氧化酶生产主要采用的发酵体系,大多数属于胞内表达存在生产成本偏高,且产出蛋白有杂质使产品纯度不够高等问题[2].因此,如何构建优良的GOD产生菌株,并让它有效的高表达,具有重要意义.本实验用SacI内切酶鉴定所保存的质粒是否正确,克隆的真核分泌型表达载体质粒pPIC9K-His-GOD转化大肠杆菌,提取重组质粒pPIC9K-His-GOD并纯化质粒.用pPIC9K-His-GOD用BlgII内切酶线性化,电转毕赤酵母菌GS115,用PCR法鉴定其基因组中是否转化成功.将得到的预期菌种做发酵表达,SDS-PAGE检测蛋白表达结果.

关键词：GOD、SDS-PAGE、pPIC9K-His-GOD、毕赤酵母GS115、大肠杆菌DH5α

分类号：R53;R39

在线出版日期：2014-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：58-60