10.3969/j.issn.1006-6195.2011.05.049
短C肽人胰岛素原突变体的设计与其编码基因的套叠PCR合成
基因工程人胰岛素作为第一个基因工程药物,自其使用以来解决了许多糖尿病人的疾苦。其后开展的一系列基因工程人胰岛素突变体的研究,发现了一些或长效或速效或高活性的突变体,丰富了治疗用胰岛素的类型。本文根据NCBI数据库中人胰岛素原的一级结构与三级结构模型,设计了-C肽被缩短至4个氨基酸残基(GPGA)的胰岛素突变体,期望该短连接肽在不去除的情况下维持胰岛素活性。依据大肠杆菌K12的密码子偏好性,设计了适宜大肠杆菌表达的该突变体的基因序列。利用套叠PCR方法扩增并克隆了该突变体基因。核苷酸序列测定结果表明,所克隆的突变体基因与设计的核苷酸序列存在2个碱基差异,但是氯基酸序列保持一致。
胰岛素原、突变体、套叠PCR
Q578(激素)
兰州理工大学博士启动基金、甘肃省自然科学基金B类重点、国家人事部留学归国人员择优资助项目资助
2012-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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