丁酸梭菌介导mTOR信号通路调控猪肠上皮细胞炎症反应的分子机制

摘要：

本试验旨在研究丁酸梭菌(CB)介导雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控产肠毒素大肠杆菌K88(ETEC K88)感染猪肠上皮细胞(IPEC-J2)炎症反应的分子机制.按试验步骤处理细胞,利用1×103 cfu/mL的ETEC K88感染IPEC-J2以及400 nmol/L的mTOR抑制剂处理IPEC-J2,到达作用时间后,分别收集细胞及培养上清,然后按照猪肿瘤坏死因子(TNF-α)和猪白细胞介素-8(IL-8)检测试剂盒说明书进行细胞因子检测,以及使用荧光定量PCR(qPCR)法进行ZO-1、occludin和mTOR表达量的检测.结果表明:与ETEC组相比,抑制剂+ETEC组、CB+ETEC组和抑制剂+CB+ETEC组ZO-1和occludin的表达量均显著升高,或有升高趋势,ZO-1的表达量分别升高了86.59％、31.48％和133.98％,occludin的表达量分别升高了69.34％、18.63％和87.52％,而mTOR的表达量分别降低了40.81％、11.62％和52.43％.与CB+ETEC组相比,抑制剂+CB+ETEC组在mTOR活性被抑制后ZO-1和occludin的表达量极显著升高了77.97％和58.07％,而mTOR的表达量极显著降低了46.18％,CB与抑制剂协同逆转ETEC造成的紧密连接蛋白表达下降.综上所述,ETEC K88能够激活mTOR信号通路,而CB通过介导mTOR信号通路能够降低ETEC K88感染IPEC-J2引起的炎症反应,并提高紧密连接蛋白的表达量,从而减轻细胞损伤.

关键词：猪肠上皮细胞;丁酸梭菌;产肠毒素大肠杆菌K88;mTOR信号通路;肠道健康

分类号：S816.5(普通畜牧学)

资助基金：天津市农业科学院青年科研人员创新研究;实验项目;天津市武清区科技计划项目;天津市"131"创新型人才团队

在线出版日期：2021-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：24-29