RNA干扰细胞黏附分子L1表达逆转胶质瘤U251细胞多药耐药
背景与目的:细胞黏附分子L1 (cell adhesion molecule L1,L1CAM)是一种跨膜黏附蛋白,在神经系统发育及肿瘤发生中发挥重要作用.本研究运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制L1CAM表达,并探讨其对胶质瘤U251细胞多药耐药的逆转作用及相关分子机制.方法:将针对L1CAM的小干扰RNA (siL1)和阴性对照siRNA (siCon)转染人胶质瘤U251细胞.实验分3组:空白对照组(胶质瘤U251细胞)、阴性对照组(转染siCon的胶质瘤U251细胞)、实验组(转染siL1的胶质瘤U251细胞).蛋白质印迹法(Western blotting)检测U251细胞中L1CAM、MRP1、pAKT及pERK1/2等蛋白表达.细胞增殖实验检测L1CAM对顺铂(cisplatin)和PI3K/AKT抑制剂LY294002抑制U251细胞增殖的影响.免疫荧光染色法检测抑制L1CAM表达对U251细胞系中AKT磷酸化情况的影响.结果:实验组L1CAM、pAKT、pERK1/2蛋白表达量明显低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.01),但实验组多药耐药蛋白MRP1表达量以及Bcl-2α/Bax与阴性对照组和空白对照组相比无明显变化.实验组顺铂和LY294002对U251细胞增殖的抑制率高于阴性对照组和空白对照组,提示抑制L1CAM表达后细胞对顺铂和LY294002的敏感性增加.免疫荧光结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比,实验组细胞内AKT磷酸化信号明显降低.结论:RNAi抑制L1CAM表达能增强顺铂和LY294002对U251细胞增殖的抑制作用,并可抑制PI3K/AKT和MAPK信号激活,一定程度上可逆转胶质瘤细胞的多药耐药性.
RNA干扰、细胞黏附分子L1、siRNA、胶质瘤、U251、顺铂、LY294002、多药耐药
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R739.41(肿瘤学)
国家自然科学基金81171138
2014-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
259-265
