视神经脊髓炎谱系疾病患者外周血TIMP1和MMP9及miR-363-5p的表达变化及其与血脑屏障破坏的关系

摘要：

目的 探讨视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)患者外周血金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)mRNA及血浆TIMP1蛋白、基质金属蛋白酶9(MMP9)及miR-363-5p的表达变化及其与血脑屏障(BBB)破坏的关系.方法 选取2019年9月至2021年11月河北医科大学第二医院收治的NMOSD患者30例,另选择健康体检者作为健康对照组10例.采用ELISA方法检测血浆TIMP1、MMP9的水平.采用qPCR法检测外周血单个核细胞(PBMC)TIMP1 mRNA和血浆miR-363-5p水平.根据脑脊液/血白蛋白商(Qalb)将NMOSD患者分为BBB正常组与BBB破坏组,分别比较NMOSD组与正常对照组以及BBB正常组与BBB破坏组TIMP1、MMP9及miR-363-5p表达差异,采用相关性分析评估其与BBB破坏的关系.采用双萤光素酶报告基因检测技术验证miR-363-5p与TIMP1靶向结合关系.通过慢病毒载体感染JURKA T细胞并分为4组:未转染miR-363-5p模拟物的正常对照组,转染miR-363-5p模拟物组,未转染miR-363-5p抑制剂的正常对照组,转染miR-363-5p抑制剂组.采用qPCR检测JURKA T细胞TIMP1 mRNA及MMP9 mRNA的表达,采用 Western-blot技术检测JURKAT细胞TIMP1、MMP9蛋白表达的水平.结果 (1)NMOSD组患者PBMC TIMP1 mRNA、血浆miR-363-5p、血浆TIMP1和MMP9蛋白水平高于健康对照组(P＜0.01或P＜0.05).NMOSD组和健康对照组MMP9/TIMP1比值比较差异无统计学意义(P＞0.05).(2)NMOSD患者BBB破坏组MMP9/TIMP1比值高于BBB 正常组(P＜0.05).NMOSD 患者 MMP9/TIMP1 比值与 Qalb 呈中等正相关(r=0.505,P＜0.01).NMOSD患者血浆miR-363-5p与PBMC TIMP1 mRNA相对表达水平无相关性(r=-0.33,P＞0.05),与血浆TIMP1蛋白表达水平呈中等负相关(r=-0.5157,P＜0.01).miR-363-5p可与TIMP1 3,UTR区结合,在JURKA T细胞中,转染miR-363-5p模拟物后TIMP1 mRNA和蛋白质表达水平下降(P＜0.01,P＜0.05).结论 NMOSD患者PBMC TIMP1 mRNA 以及血浆 TIMP1 蛋白、MMP9 蛋白、miR-363-5p 表达升高;miR-363-5p 可负调控 JURKA T细胞TIMP1的表达;血浆MMP9/TIMP1比值升高可能在NMOSD患者BBB的破坏中发挥作用.

关键词：视神经脊髓炎谱系疾病、微RNAs、miR-363-5p、金属蛋白酶1组织抑制剂、基质金属蛋白酶9、血脑屏障

所属期刊栏目：30

分类号：R744.5(神经病学与精神病学)

资助基金：河北省医学科学研究课题计划项目20210117

在线出版日期：2023-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：309-315