10.3969/j.issn.1006-2963.2015.04.009
低糖对星形胶质细胞水通道蛋白4表达及分布的影响
目的 探讨低糖体外培养对大鼠原代星形胶质细胞水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)表达量及分布的影响.方法 对体外培养的原代大鼠星形胶质细胞进行0 mmol/L(无糖)和1 mmol/L葡萄糖低糖培养,以5.5 mmol/L葡萄糖作为正常糖浓度对照进行如下实验:(1)采用活细胞成像技术检测无糖培养后的星形胶质细胞的体积变化;(2)以Western blot检测无糖培养0h、3h、6h、12h和24 h,以及0 mmol/L、1 mmol/L和5.5mmol/L葡萄糖培养24 h后星形胶质细胞的AQP4表达量;(3)以免疫荧光染色检测0 mmol/L、1 mmol/L和5.5 mmol/L葡萄糖培养6h后AQP4在星形胶质细胞上的分布.结果 (1)与0 min时比较,无糖培养15 min(1.14±0.03)和30 min时(1.15±0.02)星形胶质细胞相对体积均明显增大(P<0.01).(2)无糖0 mmol/L(含血清)培养实验中,与0 h(AQP4相对表达量为1)比较,12 h(1.55±0.21)、24 h时(1.67±0.16) AQP4相对表达量均明显增加(P<0.01);0 mmol/L、1 mmol/L和5.5 mmol/L葡萄糖(含血清)培养24 h后,与5.5 mmol/L组(AQP4相对表达量为1)比较,0 mmol/L组AQP4相对表达量(3.23±0.23)明显增加(P<0.01).(3)与0h时(AQP4相对表达量为1)比较,无糖(无血清)培养6h后AQP4蛋白相对表达量(1.32±0.09)明显上调(P<0.05),24 h时相对表达量(0.80±0.05)下降(P<0.05);0 mmol/L、1 mmol/L和5.5 mmol/L葡萄糖(无血清)培养24 h后,与5.5 mmol/L(AQP4相对表达量为1)组比较,0 mmol/L组AQP4相对表达量(0.75±0.07)明显降低(P<0.05).无论含或不含血清,与5.5 mmol/L葡萄糖组比较,0 mmol/L和1 mmol/L组AQP4在星形胶质细胞向膜上集中特异性分布更加明显.结论 低糖处理可引起星形胶质细胞水肿,AQP4蛋白表达量发生变化和向细胞膜上集中分布.AQP4在低血糖性脑水肿中可能发挥重要作用.
水通道蛋白4、低血糖、星形胶质细胞、脑水肿
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R741.02(神经病学与精神病学)
国家自然科学基金资助项目31271125
2015-09-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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