pEGFP-N1-APOE ε2重组质粒的构建与鉴定

摘要：

目的 构建pEGFP-N 1-APOEε2真核表达重组质粒.方法 应用基因定点突变手段,根据载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因cDNA克隆基因序列和表达载体增强绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-N1)质粒上的多克隆位点设计引物,对质粒APOE基因cDNA克隆(pMD18-T-APOE3)进行基因定点突变,得到含有APOE2基因的目的片段,将此目的片段插入载体启动子下游,与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的基因融合.重组质粒经菌液PCR、限制性内切酶酶切和测序,鉴定目的基因是否成功插入pEGFP-N1质粒.结果 对所得pEGFP-N1-APOEε2质粒插入部分测序结果显示,pEGFP-N1-APOEε2质粒的方向及序列正确,阅读框正确无误,表明APOEε2基因定点突变正确,重组pEGFP-N1-APOEε2质粒构建成功.结论 成功构建了pEGFP-N1-APOEε2真核表达重组质粒.

关键词：APOE ε2基因、真核表达质粒、基因重组、绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：22

分类号：R743.9(神经病学与精神病学)

资助基金：辽宁省自然科学基金计划201102105

在线出版日期：2015-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：237-240