N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚基口服基因疫苗的制备和激活SD大鼠产生循环抗体的初步报告

摘要：

目的研制携带N-甲基-D-天冬氨酸受体1(N-methyl,D-aspartate receptor subunit 1,NR1)的口服疫苗,探讨疫苗激活SD大鼠产生循环抗体的可能性.方法采用聚合酶链反应、酶切连接和蓝白筛选的方法构建NR1的表达载体;以磷酸钙共沉淀的方法转染HEK293细胞,并用G418筛选阳性细胞克隆;应用逆转录聚合酶链反应和免疫荧光细胞染色方法鉴定阳性细胞株;经氯化钙法制备携带NR1表达载体的减毒鼠伤寒沙门(氏)菌口服疫苗(SL-NR1);胃内灌注600 μL、D(λ)260 nm 为0.6 的S L-NR1,2周内4次给药;以阳性细胞株为靶细胞,用免疫荧光方法检测大鼠循环中NR1抗体滴度.结果扩增出NR1基因并构建了含有NR1基因的表达载体--pCDNA3.1-NR1;建立了细胞株 HEK 293-NR1;证实口服疫苗可激活SD大鼠(23/25只)产生NR1抗体.结论成功研制了携带NR1基因的口服减毒鼠伤寒沙门(氏)菌活疫苗,其可激活机体免疫反应产生NR1抗体.

关键词：N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚基、口服疫苗、循环抗体

所属期刊栏目：11

分类号：R741.05(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金30271330,30170960

在线出版日期：2004-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：224-226,238