NOS反义RNA重组腺相关病毒载体体内提高脑细胞耐缺血能力的实验研究

摘要：

目的 探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)反义RNA重组腺相关病毒载体(rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS)提高脑细胞耐受缺血能力的作用机制.方法 应用立体定位技术将预处理好的病毒载体转染至将要梗死侧的基底节区,转染病毒滴度为2×109mL-1,并将SD大鼠分为4组:即rAAV-AsnNOS组,rAAV-AsiNOS组,rAAV-LacZ组和对照组;处理后运用MACO建立缺血模型,每组分为缺血早期和缺血晚期,流式细胞术(FCM)检测NT阳性细胞百分比和细胞凋亡率,逆转录反应系统(RT-PCR)分析nNOS、iNOS,p38MAPK,Caspase-3 mRNA的表达.结果 一定剂量的重组病毒载体转染到大鼠海马区域,无神经损伤症状;转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血早期(缺血1～6 h),NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组降低;转染rAAV-AsiNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血晚期(缺血24～72 h),NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsnNOS组降低,差异有统计学意义.结论 转染重组病毒载体后动物模型脑神经细胞能够耐受缺血损伤,转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血早期抑制nNOS、p38MAPK和Caspase-3的表达,转染rAAV-AsiNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血晚期抑制iNOS、p38MAPK和Caspase-3的表达,从而在缺血后抑制神经细胞凋亡的发生.

关键词：脑缺血、一氧化氮合酶、凋亡、重组腺相关病毒载体

所属期刊栏目：34

分类号：R743.33(神经病学与精神病学)

资助基金：福建省教育厅科技计划项目资助JA04200

在线出版日期：2008-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：291-295