SD大鼠偏侧帕金森病模型差异表达cDNA文库的构建

摘要：

背景 帕金森病(Parkinson's disease,PD)是好发于中老年人的神经退行性疾病,随着社会的老龄化,其患病率及致残率呈上升趋势.根据流行病学调查,神经病理学研究及基因水平分析,一般认为PD的病因及其病理损伤过程是多因素的,包括遗传因素、环境毒素、氧化应激、兴奋性氨基酸毒性作用、线粒体功能障碍、细胞凋亡和神经营养因子水平降低等.对疾病分子水平变化的研究,不但为阐明疾病的发生发展提供新的资料,而且还能为其治疗开辟新的途径.然而目前对PD分子水平所知尚少,因此,揭示PD分子病理变化,具有十分重要的意义.本研究旨在构建偏侧帕金森病SD大鼠纹状体组织差异表达基因消减cDNA文库,并筛选出一些可能参与PD病理损伤过程的基因,为PD的基因治疗提供依据.方法 行SD大鼠纹状体区立体定向注射6-OHDA制备偏侧帕金森病模型;用抑制消减杂交方法分离差异表达基因的cDNA片段,连接T载体构建文库,转化扩增后随机挑取白色克隆行菌落PCR鉴定;利用反Northern杂交对重组质粒进行筛选;通过序列测定后与Genebank进行同源性比较.结果 消减文库扩增获得1500余个白色阳性克隆,随机挑取95个行PCR扩增,81%的克隆中有100～600 bp的插入片段,经反Northern杂交筛选出12个差异表达基因.结论 利用立体定向技术成功制备偏侧帕金森病SD大鼠模型;利用SSH法及T/A克隆技术成功构建偏侧帕金森病大鼠纹状体组织差异表达基因消减cDNA文库.

关键词：帕金森病、cDNA文库、差异表达、SD大鼠

所属期刊栏目：33

分类号：R394;R742.5

资助基金：国家自然科学基金30371461

在线出版日期：2007-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：193-197