中华眼镜蛇毒核糖核酸酶的分离纯化及其特殊生物学活性

摘要：

目的 从中华眼镜蛇毒中分离纯化核糖核酸酶,并研究其生物学活性.方法 以中华眼镜蛇毒为原料,采用SP-Trisacryl阳离子交换色谱、Sephadex G-75凝胶色谱、C8反相色谱等纯化方法,分离纯化具有核糖核酸酶活性的蛋白质,表征其酶学性质,检测其抑菌性、抗肿瘤细胞作用及抗氧化作用.结果 SDS-PAGE电泳显示纯化的中华眼镜蛇毒核糖核酸酶(Na-Rnase)为相对分子质量为13 000的单一成分.该酶最适反应温度为40 ℃,最适pH值为6.5,米氏常数为3.67 μmol/L,最大反应速率为3.52 pmol/s.在体外抑菌实验中,在8 μmol/L的浓度下对大肠艾希菌和金黄葡萄球菌均未显示出显著抑制作用;在体外细胞毒性实验中,对于Hela肿瘤细胞和正常的人成纤维细胞在8 μmol/L的浓度下无明显抑制作用;在抗氧化实验中,浓度达到71.5 μmol/mL时,对小鼠肝微粒体脂质过氧化反应的抑制率为41.30%.结论 中华眼镜蛇毒中的核糖核酸酶具有抗氧化作用,可能作为氧化还原的调节剂,在有关的疾病治疗方面具有应用的潜能.

关键词：中华眼镜蛇、核糖核酸酶、分离纯化、抑菌作用、细胞毒性、抗氧化

所属期刊栏目：31

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：北京市教育委员会科技发展计划面上项目KM200411417014

在线出版日期：2010-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：145-149,157