Fas胞外区基因的构建、表达、纯化及多克隆抗体的制备

摘要：

目的 构建Fas胞外区(eFas)基因的表达载体,表达纯化重组蛋白,进行多克隆抗体的制备,为进一步功能研究奠定基础.方法 通过重叠PCR获得eFas基因的鳊码序列,构建pET-22b(+)/eFas表达载体,转化大肠杆菌Rosetta-gami,IPTG诱导表达,Ni-NTA柱亲和纯化,SDS-PAGE鉴定重组蛋白的纯度.将纯化的eFas融合蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,通过ELISA方法检测多克隆抗体的效价.结果 获得了eFas的编码序列与表达裁体.目的蛋白主要在包涵体中表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化的重组蛋白纯度达95%以上.结论 eFas融合蛋白基因的构建、表达、纯化以及多克隆抗体的制备,为进一步研究Fas提供了材料.

关键词：Fas、细胞凋亡、多克隆抗体

所属期刊栏目：31

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：厦门市科技计划项目3502Z20083008

在线出版日期：2010-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：35-39