大鼠血栓调节蛋白基因的克隆及在原核细胞中的表达

摘要：

目的 研究大鼠血栓调节蛋白基因的扩增、克隆及在原核细胞中的表达.方法 以大鼠基因组DNA为模板,进行PCR扩增,用pMD18-T simple vector进行T克隆并测序.经EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切,将目的 基因克隆到pET-28a(+)表达载体质粒中,转化E.coli BL21(DE3)表达重组蛋白,通过SDS-PAGE分析表达产物.结果 含有大鼠血栓调节蛋白基因的PCR产物约为1 850 bp.重组pMD18-T simple vector质粒和重组pET-28a(+)质粒经EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切后,有相应大小的目的 片段,测序结果正确.经IPTG诱导,重组pET-28a(+)质粒在E.coli B[21(DE3)中有相对分子质量约为72 000的融合蛋白表达.结论 成功克隆了大鼠血栓调节蛋白基因,并成功表达了该基因编码的蛋白.

关键词：血栓调节蛋白、克隆、表达、PCR

所属期刊栏目：30

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：辽宁"百千万人才工程"培养经费资助2008063

在线出版日期：2009-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：171-173,177