应用酵母双杂交系统筛选Acrp30相互作用蛋白

摘要：

目的 应用酵母双杂交系统筛选Acrp30相互作用蛋白质,探讨Acrp30的功能,为2型糖尿病的发病机制和疾病的蛋白质相互作用网络研究提供线索.方法 应用酵母双杂交技术,以pGBKT7-Acrp30为诱饵质粒筛选人胎肝cDNA文库,得到阳性克隆,反复验证,并对验证后的阳性克隆的外源性片段进行测序及同源性分析.选定其中一个克隆,分别就Acrp30的球状区gAcrp30和胶原区cAcrp30,构建诱饵质粒pGBKT7-gAcrp30和pGBKT7-cAcrp30,与选定的克隆再次进行酵母双杂交,从而确定是与Acrp30的哪个区段相互作用.结果 从人胎肝cDNA文库中筛选得到约20个阳性克隆,经测序和同源性分析得到7个不同的候选基因序列,其中一个是转甲状腺素(transthyretin, TTR),分析表明,与TTR相互作用的是Acrp30的胶原区.结论 应用酵母双杂交系统,共筛选得到7个不同的基因,其编码蛋白与Acrp30有相互作用,可能与糖代谢发病机制相关.并且Acrp30主要通过胶原区与其它蛋白相互作用发挥功能.

关键词：酵母双杂交技术、Acrp30、2型糖尿病、蛋白质相互作用

所属期刊栏目：29

分类号：Q786;R96(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖南省衡阳市科技局课题06Kj42

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：153-155,160