肺癌靶向血栓蛋白hu3D3VH-tTF的表达及活性鉴定

摘要：

目的 制备一种用于肺癌血管靶向栓塞治疗的融合蛋白hu3D3VH-tTF,并鉴定其生物学活性.方法 利用重叠PCR技术构建tTF与hu3D3VH的融合基因,克隆至表达载体pET22 b(+ ),在E.coli BL21(DE3)中表达,镍亲和色谱柱纯化目的 蛋白.ELISA检测融合蛋白hu3D3VH组分与肺腺癌细胞A549选择性结合活性,凝血实验和FⅩ活化实验鉴定融合蛋白 tTF组分的促凝血活性.结果 获得序列正确的hu3D3VH/tTF /pET22 b(+)重组子,融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中高效表达.纯化后的融合蛋白与肺腺癌细胞A549具有选择性结合活性,并能活化FⅩ、有效促发血液凝固. 结论成功构建hu3D3VH/tTF/pET22 b(+)重组子,hu3D3VH/tTF 融合蛋白具有hu3D3VH的选择性结合能力同时具有TF的促凝血活性,为开展选择性肺肿瘤血管血栓性栓塞研究奠定了基础.

关键词：hu3D3VH、tTF、血栓、肺癌

所属期刊栏目：29

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：福建省自然科学基金C0410004;厦门大学校科研和教改项目XDKJCX20053026

在线出版日期：2008-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1-4