水稻纹枯病菌6-磷酸葡萄糖胺合成酶基因的克隆、测序及表达分析

摘要：

为筛选新型水稻纹枯病菌GlmS活性抑制物质,采用3′RACE和5′RACE克隆了水稻纹枯病菌GlmS的基因组DNA序列和完整的cDNA序列.GlmS基因组DNA序列全长2529bp,含有8个内含子；GlmS cDNA序列全长2094bp,推测编码一个含有697个氨基酸残基,分子量约为76.7kD的蛋白质.生物信息学分析表明水稻纹枯病菌GlmS含有1个谷氨酰胺氨基转移酶结构域和2个葡萄糖异构酶结构域.采用大肠杆菌重组融合表达GlmS,重组蛋白的分子量经过葡聚糖凝胶层析和SDS-PAGE电泳测得分别为306kD和77kD,表明GlmS是由4个相同大小亚基组成的多聚酶复合体.重组蛋白的酶学性质研究表明其最适反应温度为37℃,最适pH为6.4,42℃下的半衰期为1h,在pH5.5～7.5时比较稳定.GlmS催化反应能被己糖胺通路末端产物鸟苷氮乙酰葡萄糖胺反馈抑制.

关键词：水稻纹枯病菌、6-磷酸葡萄糖胺合成酶、活性物质、克隆表达

所属期刊栏目：26

分类号：Q755;S435.111.4+2(分子遗传学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30900929,31071754

在线出版日期：2012-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：137-143