水稻稻曲病菌G蛋白β亚基基因的克隆、表达与序列分析

摘要：

水稻稻曲病是由稻绿核真菌[Ustilaginoidea virens (Cooke) Tak]引起的一种常见的水稻后期穂部病害.G蛋白可能参与了稻曲病菌的致病过程.为了研究G蛋白在病菌致病过程中的作用,分离并分析了稻曲菌的G蛋白β亚基编码基因.根据丝状真菌G蛋白β亚基编码基因的同源保守序列设计简并引物,采用同源克隆和热不对称交错PCR的方法,分离得到了稻曲菌的G蛋白β亚基全编码基因序列.该序列的长度为2037 bp,包含4个内含子,5个外显子和1个编码359个氨基酸的开放阅读框.根据克隆到的UvGβ1 设计引物,通过RT-PCR克隆到包含整个开放阅读框的cDNA序列.该基因的DNA序列和cDNA序列在GenBank中注册的登记号分别为GU014921和GU065745.系统进化分析表明该片段与栗疫病菌(Cryphonectria parasitica)的G蛋白β亚基基因亲缘关系最近.将该基因的整个开放阅读框连接于pET-30a构建原核表达载体,通过诱导获得了重组蛋白.

关键词：水稻稻曲病菌、异三聚体G蛋白、G蛋白β亚基基因、热不对称交错聚合酶链式反应、原核表达

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分类号：Q933;S435.111.4+6(微生物学)

资助基金：国家转基因科技重大专项资助项目2008zx08001-002;浙江省三农五方科技协作计划资助项目SN200711

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：353-359