虾肝肠胞虫孢壁蛋白SWP7的多克隆抗体制备和定位分析

摘要：

孢壁作为微孢子虫最外层的结构,是连接微孢子虫与外界环境的桥梁.因此,研究孢壁蛋白对阐明宿主-微孢子虫相互作用的机制具有重要意义.本研究以虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)孢壁蛋白7(spore wall protein 7,SWP7)为研究对象,首先通过生物信息学分析其序列基本特征,然后合成该基因序列、构建原核表达载体、诱导蛋白表达并纯化,最后制备多克隆抗体.通过Western blotting验证该抗体的特异性后,利用间接免疫荧光技术观察和分析该蛋白在成熟孢子上的定位情况.结果表明,SWP7的N末端存在信号肽序列,且无跨膜域和GPI锚定位点,可能作为分泌蛋白发挥功能.同时,预测到SWP7有多个磷酸化修饰位点,可能参与肝肠胞虫信号转导、免疫应答、受体激活等功能.间接免疫荧光结果显示SWP7均匀地表达于成熟EHP孢壁上,且可能参与到萌发过程中.研究结果可为明确SWP7在肝肠胞虫入侵宿主中的功能及其机制提供理论基础.

关键词：虾肝肠胞虫、孢壁蛋白、多克隆抗体、间接免疫荧光

所属期刊栏目：12

分类号：S917.1(水产基础科学)

资助基金：国家虾蟹产业技术体系建设专项;辽宁省教育厅项目;沈阳市科技特派团项目

在线出版日期：2023-02-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-8