斑节对虾增殖细胞核抗原基因克隆及表达分析

摘要：

为研究增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在斑节对虾(Penaeus monodon)卵巢发育中的功能,利用RACE技术克隆得到了斑节对虾PCNA基因(PmPCNA)的cDNA全长序列.该序列全长978 bp,包括135 bp的5 '非编码区(5'UTR)、60 bp的3'UTR和编码260个氨基酸的783 bp的开放阅读框(ORE).同源性分析结果表明,PmPCNA与其他物种具有很高的蛋白同源性.组织表达模式分析表明,PmPCNA在所监测的各组织中为组成性表达,其中在卵巢和脑中表达量较高;卵巢发育不同阶段基因的表达分析则表明PmPCNA在Ⅲ期表达量最高,是其他各期表达量的2倍;注射五羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)后,PmPCNA在卵巢中表达量明显上升,其中在48 h表达量升高幅度最大,是对照组的5倍左右.利用原核表达技术获得了PCNA的体外重组蛋白,Western Blot分析证实该重组蛋白为PCNA蛋白.以上研究结果表明,PmPCNA蛋白是斑节对虾卵巢发育过程中的重要调节因子,本研究为进一步认识斑节对虾卵巢发育机制提供了基础资料.

关键词：斑节对虾、增殖细胞核抗原(PCNA)、卵巢发育、实时荧光定量PCR、5-羟色胺(5-HT)、原核表达

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分类号：S917(水产基础科学)

资助基金：国家自然科学基金项目31101903;海南省应用技术研发与示范推广专项ZDXM2014057;广东省海洋渔业科技推广专项A201300B03;广东省海洋渔业科技与产业发展专项A201501A11;引进国际先进农业科学技术计划948计划项目2015-Z20

在线出版日期：2016-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1052-1062