三角帆蚌外套膜细胞体外培养优化及体内植入培养对细胞生长的影响
以DMEM为基础培养基,通过优化改良培养基及缓冲液的配方,对三角帆蚌(Hyriopsis cumingii Lea)外套膜进行细胞培养,并且以显微观测、RNA/DNA 的比值作为该细胞增殖的评价指标,分别对体外培养细胞的迁出时间、速度、数量以及增殖活力进行测定。分别取体外培养第24、108、120小时的细胞进行Hoechst DNA荧光标记,然后将3组标记细胞植入三角帆蚌外套膜中在蚌体内培养,在植入后第24、72、120、168、216小时运用RNA/DNA指标检测活体培养的细胞增殖活力。结果表明,经过优化后的缓冲液和培养基更有利于细胞从外套膜组织中迁出,迁出速度和细胞数量显著增加(P<0.05),且细胞的活力随着培养时间的延长而逐渐增大,培养至108 h时,细胞活力达到最大, RNA/DNA比值为24.53,在108 h后显著下降(P<0.05),显微观测的细胞生长状况与RNA/DNA 指标测定相吻合。对体外培养的细胞植入蚌体外套膜中再进行培养时发现,对体外培养活力较好的细胞,活体内环境可增大细胞的活力, RNA/DNA比值最高达到25.45,但在活体培养168 h 后活力显著下降(P<0.05)；而对体外培养活力较差的细胞,活体内环境对细胞活力影响不显著(P>0.05)。本研究旨在为三角帆蚌外套膜细胞增殖的深入研究及建株提供基础性资料。
三角帆蚌、外套膜、细胞培养、组织培养、RNA/DNA活力检测、淡水珍珠
S968(水产养殖技术)
国家自然科学基金资助项目31201991;上海市博士后科研资助计划面上项目09R21413200;教育部博士点基金项目20123104120003;上海市优秀青年项目ssc11004;上海市重点学科水生生物学建设项目S30701;上海市高校知识服务平台项目ZF1206;上海海洋大学博士启动基金
2014-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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