致病性哈维氏弧茵溶血素基因克隆及其检测

摘要：

从山东沿海的发病鲈鱼(Lateolabrax japonicus)分离到1株致病性哈维氏弧菌(Vibrio harveyi),从该菌的染色体DNA扩增出一条长约1.4 kb的特异性片段.DNA序列分析表明,该克隆片段含有完整的1 254 bp溶血素基因,该溶血素基因与哈维氏弧菌VIB645的溶血素基因VhhA和VhhB的相似性分别为99.0%和98.5%;与副溶血弧菌(v.parahaemolyticus)热稳定性溶血素基因(TDH)的相似性为74.5%;与拟态弧菌(V.mimicus)、创伤弧菌(V.vulnificus)、霍乱弧菌(V.cholerae)磷脂酶基因的序列相似性分别为57.4%、59.2%、53.0%;与最小弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌、霍氏弧菌(V.hollisae)、河流弧菌(V.fluvialis)、鳗弧菌(V.anguillarum)的溶血素基因的相似性仅为19.9%～24.8%.根据溶血素基因的保守区段,设计了1对特异引物.分析表明,该引物能特异检测哈维氏弧菌,其可检测的DNA最小量为0.001 ng.用该方法对55株不同来源的患病鱼分离的疑似病原菌进行检测,结果检出8株哈维氏弧菌,检出率为14.55%,从健康动物中检出数占所检弧菌数的6.25%,海洋环境为10.53%,海水养殖环境为26.53%,表明哈维氏弧菌在不同的海水环境及健康海洋动物中普遍存在,在养殖水体中的数量高于其他海水环境.

关键词：哈维氏弧菌、溶血素、基因克隆、海水环境

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分类号：S94(水产保护学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA620207;国家自然科学基金30371108,30371119

在线出版日期：2005-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：580-587