多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价

摘要：

目的 应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价.方法 根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行最佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测.结果 单增李斯特菌MCDA检测方法的最佳反应温度为61℃.单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10 fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍.对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法.结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测.

关键词：单增李斯特菌、多交叉置换扩增、lmo0733基因、最低检测限

所属期刊栏目：34

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家重大传染病防治科技重大专项2013ZX10004-101;传染病预防控制国家重点实验室2015SKLID507;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所No.2016ZZKTB09联合资助 Supported by the National Major Science and Technology Project of Prevention and Control in Significant Infectious Disease2013ZX10004-101;the State Key Laboratory of Infectious Disease Prevention and Control2015SKLID507;the National Institute for Communicable Disease Control and Prevention,Chinese Center for Disease Control and Prevention2016ZZKTB09

在线出版日期：2018-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：99-104